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撰文丨王聪七雄争霸网页版官网

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剪辑丨王多鱼

排版丨水成文

1999年，患有严重遗传病鸟氨酸转氨甲酰酶零落症的18岁少年Jesse Gelsinger，在接收宾夕法尼亚大学James Wilson锻真金不怕火主导的腺病毒基因休养临床施行后，发生严重免疫响应后亏本，成为第一个因基因休养而死的东谈主。

悲催发生后，James Wilson锻真金不怕火开动寻找更安全的病毒载体，最终他们开辟并实诈骗用了腺关系病毒（AAV）。AAV具有安全性好、宿主细胞边界广和体内抒发时间长等优点，成为现在应用最平时的体内基因休养载体。

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2017年底，Spark Therapeutics开辟的AAV基因疗法Luxturna取得好意思国FDA批准上市，用于休养RPE65基因突变导致的先天性黑蒙症2型，始创了基因休养的新篇章，也掀翻了基因疗法开辟新高涨。

可是，靶向肝脏的AAV基因疗法还濒临着转入基因抒发服从和抒发抓久性有限的挑战。AAV时时被以为以游离态存在于细胞中，但无意候也会插入整合到宿主细胞基因组中，这可能是宿主细胞在DNA建造经过满意外导致的。但 这也导致东谈主们缅想AAV载体可能阻挠宿主细胞基因组并导致。

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2023年11月6日，James Wilson锻真金不怕火团队在Nature Biotechnology期刊发表了题为：Integrated vector genomes may contribute to long-term expression in primate liver after AAV administration 的连系论文。

湮灭天，James Wilson锻真金不怕火团队还在Human Gene Therapy期刊发表了题为： Prevalent and Disseminated Recombinant and Wild-Type Adeno-Associated Virus Integration in Macaques and Humans 的连系论文。

这两项连系是迄今为止在非东谈主灵长类动物中进行的对于AAV对宿主基因组整合的最全面探索，对AAV基因休养的安全性和弥远疗效具有迫切酷好。 该连系标明了 靶向肝脏的腺关系病毒（AAV）整合到宿主细胞基因组中，提供了弥远抓久抒发的后劲，而不太可能驱动致癌突变。

之前的靶向小鼠 （尤其是荣达小鼠） 肝脏的AAV基因休养的连系发现，AAV载体基因组的插入整合不错通过阻挠基因组中阻断癌症的调控元件而激励肝癌。但这种情况是否也会发生在东谈主类和其他灵长类动物身上还不明晰。

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在发表于Human Gene Therapy期刊的论文中，连系团队查抄了86只山公的组织样本（主如果肝脏样本），这些山公在临床前观望中接收了基于AAV的基因休养，还查抄了253个从未构兵过工程化AAV的山公和东谈主类（168只山公、85个东谈主类）的组织样本（主如果肝脏样本）。

限制闪现，这些接收工程化AAV基因休养的山公，以及只构兵过野生型AAV（当然界中存在的自然AAV）的山公和东谈主类，AAV在总共基因组中以以当场散布的神气插入的概率很低，扩展风险也很低，即使在AAV基因休养15年后的山公体内亦然如斯。

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在发表于Nature Biotechnology期刊的论文中，连系团队对12只山公进行了两年多的追踪连系，这些山公接收了靶向肝脏的AAV基因休养。

靶向肝脏的腺关系病毒（AAV）基因疗法已被批准用于休养血友病A型和血友病B型，此外，还有好多靶向肝脏的AAV疗法处于临床开辟后。 可是，靶向肝脏的AAV基因疗法存在两大挑战——一个是AAV在肝脏中的抓久性，另一个是难以再次给药。之前在血友病B型的AAV基因休养临床连系标明，休养的前2个月内疗效就开动下落。此外，Crigler-Najjar详细征（一种隐性遗传的高胆红素血症）患者接收AAV基因休养后，血清胆红素会立即裁汰，但2个月内又会收复到休养前水平，患者莫得显著的AAV载体免疫或肝脏炎症，这标明可能曲直免疫机制导致的疗效丧失。

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可是，在抓续几个月的抒发不稳依期后，非东谈主灵长类动物（NHP）和东谈主类肝脏中的AAV抒发水平会保抓在一个较低水平，这令东谈主骇怪，因为 肝细胞会束缚分辨更新，表面上游离的AAV基因组应该束缚被稀释才对。

为了搞明晰其中的原因，James Wilson锻真金不怕火对非东谈主灵长类动物（NHP）静脉打针的AAV8和AAVrh10载体，进行了跨越2年时间的不雅察和评估，以更好地界说影响基因休养恶果的AAV转导机制。

连系限制闪现，非免疫原性转基因的高度转导得以末端，尽管抒发在前90天内开动下落，并达到一个较低但牢固的抒发情景。跨越10%的肝细胞仍存在AAV载体DNA的单核结构域，尽管其转入的基因抒发可能依然丢失。而免疫原性转基因不雅察到AAV载体DNA和RNA的更猛进程的减少。此外，在基因组的不同位置，整合到染色体中的AAV载体序列的频率很低，况且这些位置均与肝癌关系基因不左近，并在随访的几年里莫得显著克隆膨胀的凭证。

南苏丹男篮在世界杯被分在B组，同组的球队还有中国男篮、塞尔维亚男篮与波多黎各男篮。塞尔维亚男篮的小组实力第一，波多黎各男篮没有现役NBA球员，阿尔瓦拉多被鹈鹕禁止参赛。

这些限制标明，在灵长类动物肝细胞中，AAV介导的转基因抒发发生在两个阶段：领先，来自游离的AAV基因组的高水平但短时间的抒发；然后是低水平但抓续牢固的抒发，这标明灵长类动物肝脏中AAV基因休养的抓久性可能是由于AAV载体的整合。

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论文勾通：

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https://www.nature.com/articles/s41587-023-01974-7

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https://www.liebertpub.com/doi/10.1089/hum.2023.134